
保持實驗鼠的健康,對于實驗結果的穩定性和可重復性至關重要。但在實際操作中,實驗鼠由于各種原因導致感染的情況屢見不鮮。被細菌,病毒和體內外寄生蟲感染的小鼠,不僅自身健康受到威脅,混淆研究成果,甚至還有可能傳播給其他品系的小鼠,因此小鼠的凈化非常關鍵和必要。
問題一:什么時候需要將小鼠進行凈化處理?
在正常的飼養過程中,如果小鼠狀態正常,凈化是不必要的,但是遇到以下情況建議凈化:
1) 動物實驗結果不穩定,重復性差,實驗鼠已經確認受到病原體污染;
2) 懷疑受到感染,但是已經出現以下癥狀:繁殖能力降低,實驗鼠健康狀態不好,已經影響到實驗鼠生命或者影響實驗結果;
3) 進口鼠漂洋過海來到國內動物房,需要隔離檢疫以及凈化;
4) 實驗鼠要“搬家”,“新家”的屏障系統更嚴格。
問題二:凈化的方法有哪些?各個方法的區別在哪里?
凈化是將確認病原體感染或者疑似感染的“臟鼠”傳代獲得不含特定病原體的子代鼠;為了實驗鼠品系的健康不受到威脅,保證后續實驗不受病原體感染影響;同時也可以為動物屏障內其他品系的健康保駕護航。
那么凈化如何做?
實驗鼠自身雖然被感染,但是精子或卵細胞在體內是干凈無菌,很多情況下凈化是要從感染的親本中,獲得“干凈”的子代。凈化方式有以下3種:
體內胚胎移植
將雄鼠和超排后的雌鼠交配,然后處死見栓的雌鼠,通過沖洗輸卵管的方式收集受精卵,胚胎移植到無感染的假孕母鼠輸卵管或者子宮中,從而獲得凈化后的實驗鼠品系。
優點:
獲得的子代鼠仔是足月生產。
缺點:
2獲得子代數量有限;
2檢栓后,見栓的雌鼠都會被處死,但是處死后不一定都能取到受精卵,因此有可能出現斷種。
IVF凈化
雄鼠處死后取精子,然后將激活后的精子與超排的卵母細胞進行體外受精(IVF)得到受精卵,再移植到代孕小鼠的子宮中,生育出凈化的子代鼠仔。
優點:
IVF技術可以實現1只雄鼠對應10-20只雌鼠同時受孕,因此在凈化的同時,還能達到快速繁育的目的,同時獲得更多數目的子代鼠,效率高,縮短繁育周期,極大地加快科研進度。
缺點:
建議由專業機構操作
剖腹產
由于胎盤屏障會隔絕大部分病原微生物,因此可以通過剖腹產的方式,取出后代鼠,從而獲得沒有被感染的新一代實驗鼠。剖腹產過程中,為了避免子代受到感染,母鼠處死后以及剖出的鼠仔都要消毒。此外還要提前準備好代乳奶媽,提前做好食仔預防,剖出的鼠仔后續要由奶媽代養。
優點:
實驗鼠自然交配即可,凈化快。
缺點:
2獲得子代數量有限;
2需要精確掌握母鼠的生產時間,在母鼠生產前進行剖腹產,否則剖出的鼠仔就屬于早產,后續飼養也有比較高的死亡風險;
2垂直傳播的病原微生物感染是不能通過該種方式進行。
問題三:如何選擇凈化方式?
由于剖腹產存在“早產”和食仔的風險,為了減少對后續實驗的影響,現在很少采用這種方式。體內胚胎移植和IVF凈化這兩種凈化方式,可以根據現有小鼠情況以及后續實驗需要而定:

濟世金編通過IVF的方法提供小鼠凈化服務,凈化后的實驗鼠通常是SPF級的;為了確保凈化效果,凈化完成后會將小鼠品系單獨送檢,檢測合格后再交付實驗室使用。
價格:5000元/品系

凈化前,小鼠感染了細菌和病毒,狀態較差;凈化后,小鼠達到或超過SPF級,基本不帶有細菌和病毒。